experimento de la mitosis

introducción 

La mitosis es un proceso en el cual la célula se reproduce dando lugar a dos células hijas exactamente idénticas con la misma cantidad de cromosomas y organelas. Este proceso es más característico en células eucariota. La mitosis forma parte del ciclo celular y se divide en cinco fases: profase, en donde los cromosomas se condensan, se duplica el centrosoma y se comienza a ensamblar el huso mitótico; prometafase, en donde la membrana nuclear se desorganiza y se unen los cinetocoros de los cromosomas a los microtúbulos del huso mitótico; metafase, en la cual los microtúbulos del huso alinean a los cromosomas (en su máxima condensación) al “ecuador” de la célula; anafase, en donde las cromátidas hermanas son separadas por los microtúbulos migrando una a cada polo de la célula; y la telofase, en donde se reorganiza las membranas nucleares y los cromosomas vuelven a su estado laxo. Luego de haber pasado por estas cinco fases, la célula se divide en dos en un proceso llamado citocinesis. En este caso se va a estudiar la mitosis en la allium cepa (cebolla), más en específico, en las raíces. Las células de ésta son células eucariotas, es decir que cada una contiene el mismo material genético (8 pares de cromosomas) en su núcleo. 

Objetivos 

-Realizar un preparado de las raíces de la allium cepa para observar el proceso de mitosis, llevado a cabo en sus células, bajo el microscopio óptico. 
-bservar y analizar las fases de la mitosis bajo el microscopio óptico. 
-Familiarizarse con el uso del microscopio óptico. 

Materiales 

-Tijeras 
-Pinzas de disección 
-Aguja 
-Cebolla 
-Vaso de precipitados 
-Agua 
-Solución de Carnoy (etanol y ácido acético glacial 3:1) 
-Ácido Clorhídrico 1N 
-Carmín acético 
-Vidrio de reloj 
-Pinzas de madera 
-Mechero Bunsen 
-Trípode 
-Malla metálica 
-Portaobjetos 
-Cubreobjetos 
-Microscopio óptico 

Metodología 

1.Cinco o seis días antes de comenzar el experimento, escoja un bulbo de cebolla fresca y elimine, mediante un raspado con una cuchilla, las raíces secas que se hallan en la base del bulbo. Coloque la cebolla en un frasco de boca ancha. 

1. Vierta agua en el frasco, hasta tocar la base de la cebolla. Mantenga la base de la cebolla húmeda y cambie el agua diariamente. 
2.Cuando las raíces tengan la longitud suficiente, corte 1cm de su punta. 
3.Deposite las raíces en solución de Carnoy drante 20 minutos. 
4.Traslade las raíces a un recipiente con ácido clorhídrico 1N durante 10 minutos. 
5.Coloque las raíces en un recipiente con abundante agua, y lávelas por 5 minutos. 
6.Traslade las raíces a un vidrio de reloj, y cúbralas con acetocarmín. 
7.Caliente el vidrio de reloj a baño maría unos minutos, evitando que hierva. 
8.Deje las raíces cubiertas por el acetocarmín durante 20 minutos por lo menos. 
9.Ponga las raíces en un portaobjetos. 
10.Utilizando una aguja corte la raíz en forma longitudinal, varias veces. 
11.Coloque una gota de acetocarmín sobre las raíces. 
12.Coloque el cubreobjetos en ángulo recto al lado de las raíces. Bájelo lentamente sobra ellas hasta que se pose sobre el preparado, cuidando que no queden burbujas de aire retenidas. Coloque un papel absorbente sobre el cubre objetos y ejerza sobre él presión vertical, cuidando que no se corra. 
13.Observe los preparados bajo el microscopio óptico, con el mayor aumento. Identifique las diferentes fases de la mitosis y dibújelas. 
14.Calcule el índice mitótico según: 

Im = N° de células en división ×100 / N° total de células 
Calcule la duración relativa de cada estadío de la mitosis (índice de fases) utilizando la siguiente fórmula: 
Ifase = N° de células en esa fase ×100 / N° total de células en mitosis 

Etapas de la mitosis: 

mitosis

La mitosis es un tipo de división celular en el cual una célula (la madre) se divide para producir dos nuevas células (las hijas) que son genéticamente idénticas entre sí. En el contexto del ciclo celular, la mitosis es la parte donde el ADN del núcleo de la célula se divide en dos grupos iguales de cromosomas.

La gran mayoría de las divisiones celulares que suceden en tu cuerpo implica mitosis. Durante el desarrollo y el crecimiento, la mitosis llena el cuerpo de un organismo con células, y durante la vida de un organismo, sustituye células viejas y gastadas con células nuevas. Para los organismos eucariontes de una sola célula, como la levadura, las divisiones mitóticas en realidad son una forma de reproducción que agrega nuevos individuos a la población.

En todos estos casos, la “meta” de la mitosis es asegurarse de que cada célula hija obtenga un juego completo y perfecto de cromosomas. Las células con demasiados cromosomas o cromosomas insuficientes generalmente no funcionan bien: tal vez sean incapaces de sobrevivir o incluso causen cáncer. Así, cuando las células experimentan mitosis, no dividen su ADN al azar y lo echan en montones para las dos células hijas. Al contrario, reparten sus cromosomas duplicados en una serie de pasos cuidadosamente organizada.

Fases de la mitosis

La mitosis consiste en cuatro fases básicas: profase, metafase, anafase y telofase. Algunos libros de textos mencionan cinco porque separan la profase en una fase temprana (llamada profase) y una fase tardía (llamada prometafase). Estas fases ocurren en orden estrictamente secuencial y la citocinesis —el proceso de dividir el contenido de la célula para hacer dos nuevas células— comienza en la anafase o telofase.

Etapas de la mitosis: profase, metafase, anafase y telofase. La citocinesis típicamente se superpone con la anafase o telofase.

Puedes recordar la orden de las fases con el famoso truco mnemónico: [Por favor] Poda el MATorral. Pero no te obsesiones demasiado con los nombres, lo más importante es entender qué está sucediendo en cada etapa y por qué es importante para la división de los cromosomas.

Fase G2 tardía. La célula tiene dos centrosomas, cada uno con dos centriolos, y el ADN ha sido copiado. En esta fase, el ADN está rodeado por una membrana nuclear intacta y el nucleolo está presente en el núcleo.

Comencemos examinando una célula justo antes de que comience la mitosis. Esta célula está en la interfase (fase G$_2$start subscript, 2, end subscript tardía) y ya ha copiado su ADN, así que los cromosomas en el núcleo constan de dos copias conectadas, llamadas cromátidas hermanas. No puedes ver los cromosomas muy claramente en este punto porque todavía están en su forma larga, fibrosa y descondensada.

Esta célula animal también ha hecho una copia de su centrosoma, un organelo que desempeñará un papel clave en la orquestación de la mitosis, así que hay dos centrosomas. (Las células vegetales generalmente no tienen centrosomas con centriolos, sino que tienen un tipo diferente de centro de organización de microtúbulos que desempeña un papel similar).

Profase temprana. El huso mitótico comienza a formarse, los cromosomas empiezan a condensarse y el nucleolo desaparece.

En la profase temprana, la célula comienza a deshacer algunas estructuras y construir otras, y así prepara el escenario para la división de los cromosomas.

• Los cromosomas comienzan a condensarse (lo que hace que sea más fácil separarlos después).
• El huso mitótico comienza a formarse. El huso es una estructura hecha de microtúbulos, fibras fuertes que son parte del “esqueleto” de la célula. Su función es organizar los cromosomas y moverlos durante la mitosis. El huso crece entre los centrosomas a medida que se separan.
• El nucléolo, que es una parte del núcleo donde se hacen los ribosomas, desaparece. Esto es una señal de que el núcleo se está alistando para descomponerse.

Profase tardía (prometafase). La envoltura nuclear se descompone y los cromosomas se condensan completamente.

En la profase tardía (a veces también llamada prometafase), el huso mitótico comienza a capturar y a organizar los cromosomas.

• Los cromosomas terminan la condensación, por lo que están muy compactos.
• La envoltura nuclear se descompone y los cromosomas se liberan.
• El huso mitótico crece más y algunos de los microtúbulos empiezan a “capturar” cromosomas.

Anatomía del huso mitótico. Diagrama que indica los microtúbulos del cinetocoro (unidos a los cinetocoros) y el áster. El áster es una formación de microtúbulos que irradia desde el centrosoma hacia el borde de la célula. El diagrama también indica la región centromérica de un cromosoma, la “cintura” estrecha donde las dos cromátidas hermanas están conectadas con más fuerza y el cinetocoro, una sección de proteínas localizada en el centrómero.

Los microtúbulos puede unirse a los cromosomas en el cinetocoro, una sección de proteína en el centrómero de cada cromátida hermana. (Los centrómerosson las regiones de ADN donde las cromátidas hermanas están conectadas más fuertemente).

Los microtúbulos que unen a un cromosoma se llaman microtúbulos del cinetocoro. Los microtúbulos que no se unen a cinetocoros pueden agarrarse de los microtúbulos del polo opuesto, lo que estabiliza el huso. Microtúbulos adiconales irradian de cada centrosoma hacia el borde de la célula, formando una estructura llamada áster.

Metafase. Los cromosomas se alinean en la placa metafásica, bajo tensión del huso mitótico. Las dos cromátidas hermanas de cada cromosoma son capturadas por los microtúbulos de polos opuestos del huso.

En la metafase, el huso ha capturado todos los cromosomas y los ha alineado en el centro de la célula, listos para dividirse.

• Todos los cromosomas se alinean en la placa metafásica (no una estructura física, solo un término para el plano donde se alinean los cromosomas).
• En esta etapa, los dos cinetocoros de cada cromosoma deben unirse a los microtúbulos de los polos opuestos del huso.

Antes de proceder a la anafase, la célula comprobará que todos los cromosomas estén en la placa metafásica con sus cinetocoros unidos correctamente a los microtúbulos. Esto se llama punto de control del huso y ayuda a asegurar que las cromátidas hermanas se dividan uniformemente entre las dos células hijas cuando se separan en el paso siguiente. Si un cromosoma no está correctamente alineado o unido, la célula detendrá la división hasta que se resuelva el problema.

Anafase. Las cromátidas hermanas se separan una de la otra y son jaladas hacia los polos opuestos de la célula. Los microtúbulos que no están unidos a los cromosomas empujan los polos del huso en direcciones contrarias, mientras que los microtúbulos del cinetocoro jalan a los cromosomas hacia los polos.

En la anafase, las cromátidas hermanas se separan una de la otra y son jaladas hacia los polos opuestos de la célula.

• El “pegamento” proteico que mantiene juntas a las cromátidas hermanas se degrada, lo que permite que se separen. Cada una ahora es su propio cromosoma. Los cromosomas de cada par son jalados hacia extremos opuestos de la célula.
• Los microtúbulos no unidos a los cromosomas se elongan y empujan para separar los polos y hacer más larga a la célula.

Todos estos procesos son impulsados por proteínas motoras, máquinas moleculares que pueden “caminar” a lo largo de circuitos de microtúbulos y llevar una carga. En la mitosis, las proteínas motoras llevan cromosomas u otros microtúbulos mientras caminan.

Telofase. El huso desaparece, una membrana nuclear se vuelve a formar alrededor de cada grupo de cromosomas y un nucléolo reaparece en cada nuevo núcleo. Los cromosomas también comienzan a descondensarse.

En la telofase, la célula casi ha terminado de dividirse y comienza a restablecer sus estructuras normales mientras ocurre la citocinesis (división del contenido de la célula).

• El huso mitótico se descompone en sus componentes básicos.
• Se forman dos nuevos núcleos, uno para cada conjunto de cromosomas. Las membranas nucleares y los nucléolos reaparecen.
• Los cromosomas comienzan a descondensarse y vuelven a su forma "fibrosa".

Citocinesis en células animales y vegetales

Citocinesis en una célula animal: un anillo de actina alrededor del centro de la célula se cierra hacia adentro y forma una hendidura llamada surco de división.

Citocinesis en una célula vegetal: la placa celular se forma en el centro de la célula y crea una nueva pared que la divide en dos.

La citocinesis, la división del citoplasma para formar dos nuevas células, se superpone con las etapas finales de la mitosis. Puede comenzar en la anafase o telofase, según la célula, y finaliza poco después de la telofase.

En las células animales, la citocinesis es contráctil, pellizca la célula en dos como un monedero con un cordón ajustable. El “cordón” es una banda de filamentos hechos de una proteína llamada actina y el pliegue del cordón se conoce como surco de división. Las células vegetales no pueden dividirse de esta forma porque tienen una pared celular y son demasiado rígidas. En vez de eso, se forma una estructura llamada placa celular en el centro de la célula que la divide en dos células hijas separadas por una nueva pared.

Cuando la división termina, produce dos células hijas. Cada célula hija tiene un grupo completo de cromosomas, idéntico al de su hermana (y al de la célula madre). Las células hijas se incorporan al ciclo celular en G1.

Cuando la citocinesis acaba, terminamos con dos nuevas células, cada una con un juego completo de cromosomas idénticos a los de la célula madre. Las células hijas pueden ahora comenzar sus propias “vidas” celulares y —según lo que decidan ser cuando crezcan— pueden experimentar mitosis ellas mismas y repetir el ciclo.