La mitosis es un proceso en el cual la célula se reproduce dando lugar a dos células hijas exactamente idénticas con la misma cantidad de cromosomas y organelas. Este proceso es más característico en células eucariota. La mitosis forma parte del ciclo celular y se divide en cinco fases: profase, en donde los cromosomas se condensan, se duplica el centrosoma y se comienza a ensamblar el huso mitótico; prometafase, en donde la membrana nuclear se desorganiza y se unen los cinetocoros de los cromosomas a los microtúbulos del huso mitótico; metafase, en la cual los microtúbulos del huso alinean a los cromosomas (en su máxima condensación) al “ecuador” de la célula; anafase, en donde las cromátidas hermanas son separadas por los microtúbulos migrando una a cada polo de la célula; y la telofase, en donde se reorganiza las membranas nucleares y los cromosomas vuelven a su estado laxo. Luego de haber pasado por estas cinco fases, la célula se divide en dos en un proceso llamado citocinesis. En este caso se va a estudiar la mitosis en la allium cepa (cebolla), más en específico, en las raíces. Las células de ésta son células eucariotas, es decir que cada una contiene el mismo material genético (8 pares de cromosomas) en su núcleo.
Objetivos
-Realizar un preparado de las raíces de la allium cepa para observar el proceso de mitosis, llevado a cabo en sus células, bajo el microscopio óptico.
-bservar y analizar las fases de la mitosis bajo el microscopio óptico.
-Familiarizarse con el uso del microscopio óptico.
Materiales
-Tijeras
-Pinzas de disección
-Aguja
-Cebolla
-Vaso de precipitados
-Agua
-Solución de Carnoy (etanol y ácido acético glacial 3:1)
-Ácido Clorhídrico 1N
-Carmín acético
-Vidrio de reloj
-Pinzas de madera
-Mechero Bunsen
-Trípode
-Malla metálica
-Portaobjetos
-Cubreobjetos
-Microscopio óptico
Metodología
1.Cinco o seis días antes de comenzar el experimento, escoja un bulbo de cebolla fresca y elimine, mediante un raspado con una cuchilla, las raíces secas que se hallan en la base del bulbo. Coloque la cebolla en un frasco de boca ancha.
1. Vierta agua en el frasco, hasta tocar la base de la cebolla. Mantenga la base de la cebolla húmeda y cambie el agua diariamente.
2.Cuando las raíces tengan la longitud suficiente, corte 1cm de su punta.
3.Deposite las raíces en solución de Carnoy drante 20 minutos.
4.Traslade las raíces a un recipiente con ácido clorhídrico 1N durante 10 minutos.
5.Coloque las raíces en un recipiente con abundante agua, y lávelas por 5 minutos.
6.Traslade las raíces a un vidrio de reloj, y cúbralas con acetocarmín.
7.Caliente el vidrio de reloj a baño maría unos minutos, evitando que hierva.
8.Deje las raíces cubiertas por el acetocarmín durante 20 minutos por lo menos.
9.Ponga las raíces en un portaobjetos.
10.Utilizando una aguja corte la raíz en forma longitudinal, varias veces.
11.Coloque una gota de acetocarmín sobre las raíces.
12.Coloque el cubreobjetos en ángulo recto al lado de las raíces. Bájelo lentamente sobra ellas hasta que se pose sobre el preparado, cuidando que no queden burbujas de aire retenidas. Coloque un papel absorbente sobre el cubre objetos y ejerza sobre él presión vertical, cuidando que no se corra.
13.Observe los preparados bajo el microscopio óptico, con el mayor aumento. Identifique las diferentes fases de la mitosis y dibújelas.
14.Calcule el índice mitótico según:
Im = N° de células en división ×100 / N° total de células
Calcule la duración relativa de cada estadío de la mitosis (índice de fases) utilizando la siguiente fórmula:
Ifase = N° de células en esa fase ×100 / N° total de células en mitosis
Etapas de la mitosis:
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